# Spectrophotomètre Biochrom Libra

<p class="callout info">**Manuel avancé d'utilisation du spectrophotomètre (en anglais)** : [https://www.aquaterra.hu/upload/document/catalog\_data/21257/biochrom\_libra\_s50\_s60\_s70\_s80\_user\_manual\_v2.pdf](https://www.aquaterra.hu/upload/document/catalog_data/21257/biochrom_libra_s50_s60_s70_s80_user_manual_v2.pdf) </p>

#### **<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">INTRODUCTION AU SPECTROPHOTOMÈTRE BIOCHROM LIBRA S60  
</span></span></span>**

<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">**Le Biochrom Libra** est un spectrophotomètre -</span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"> dispositif optique conçu pour faire passer l'énergie lumineuse à travers un </span></span><span class="jCAhz JxVs2d"><span class="ryNqvb">échantillon.</span></span> <span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">La réduction de la transmission de l'énergie lumineuse et des pics d'absorbance correspondants</span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"> sont utilisés pour **déterminer la composition de l’échantillon** </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">ou, par comparaison avec des étalons de concentration connus, pour **déterminer le** </span></span>**<span class="jCAhz JxVs2d"><span class="ryNqvb">concentration d'un échantillon.</span></span>** </span>

<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Le Biochrom Libra permet des études </span></span><span class="jCAhz JxVs2d"><span class="ryNqvb">dans la gamme **de 190 à 1100 nm** - c'est un <span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b">spectrophotomètre UV/visible.</span></span></span></span>

#### **Description du spectrophotomètre** 

<table border="1" id="bkmrk--1" style="border-collapse: collapse; width: 100%;"><colgroup><col style="width: 50%;"></col><col style="width: 50%;"></col></colgroup><tbody><tr><td>[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/UTkimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-05/img-7289.jpg)</td><td>[![IMG_7290.jpg](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-05/scaled-1680-/QkPimg-7290.jpg)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-05/QkPimg-7290.jpg)

</td></tr></tbody></table>

Le spectrophotomètre permet de **mesurer plusieurs cuves simultanément**. Sur la photo de gauche, on peut voir le compartiment où on place notre cuve d'échantillon à analyser à gauche. Sur la photo de droite, l'emplacement de la cuve la plus éloigné correspond à l'emplacement du blanc d'absorption. Les 5 autres compartiments correspondent à l'emplacement des cuves avec l'échantillon.

<p class="callout info">Il faut faire attention à l'emplacement des cuves et le sens du faisceau lumineux. Orientez le côté transparent de vos cuves sur le bord droit du spectrophotomètre.   
</p>

#### **<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Fonctionnement de l'équipement: </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Contrôles et indicateurs</span></span></span>**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/ZPRimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/ZPRimage.png)

L'indicateur en haut à gauche : **LED USB** indique que l'instrument enregistre sur la clé USB. La clé ne doit pas être retirée tant que ce voyant est allumé.

L'indicateur en bas : **état de l'instrument**

- <span style="color: rgb(230, 126, 35);">**Orange -<span style="color: rgb(0, 0, 0);"> </span>**<span style="color: rgb(0, 0, 0);">pendant le démarrage et la calibration</span></span>
- <span style="color: rgb(230, 126, 35);"><span style="color: rgb(45, 194, 107);">**Vert -**<span style="color: rgb(0, 0, 0);"> l'instrument est allumé et a passé les tests de calibration de démarrage</span></span></span>
- <span style="color: rgb(230, 126, 35);">**<span style="color: rgb(224, 62, 45);">Rouge -</span>** <span style="color: rgb(0, 0, 0);">l'instrument est allumé et a échoué aux tests de calibration de démarrage</span></span>

<span style="color: rgb(0, 0, 0);">**Si le voyant sous l'écran est rouge au démarrage, rallumez la machine. Si le problème persiste, signalez l'anomalie à un membre du personnel.** </span>

#### **Comment utiliser le<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"> BIOCHROM LIBRA S60</span></span></span>**

#####  **Démarrage**

1. **Commencez par allumer l'appareil.** Appuyez sur le bouton d'alimentation à gauche de la machine au niveau du câble d'alimentation. Le spectrophotomètre effectuera ensuite une série de test pendant 5mn. Vous pouvez commencer à l'utiliser dès que le voyant sous l'écran apparait vert.<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"> </span></span>Les meilleures performances sont obtenues si l'instrument **est allumé pendant** </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">**au moins 30 minutes avant d’être utilisé** .</span></span></span>
2. **Reliez l'appareil à l'ordinateur.** Rendez-vous sur le logiciel "Spectro" sur le bureau de l'ordinateur après avoir ouvert le spectrophotomètre. La connexion devrait se faire automatiquement.
3. <span class="HwtZe" lang="fr">**<span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Préparez les échantillons à blanc (des références)</span></span>**<span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">  
    </span></span></span>
4. <span class="HwtZe" lang="fr">**<span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Préparez les solutions des échantillons.</span></span>** <span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">La solution échantillon comprend normalement l'échantillon </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">à tester dissous dans la solution de référence. </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Lorsque vous placez les cellules dans l'équipement, assurez-vous que la cellule est orientée de manière à ce que la lumière </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">passera par la cellule</span></span>.</span>

<p class="callout info">Vous pouvez aussi directement utiliser l'interface du spectrophotomètre sans passer par l'ordinateur et extraire vos donnés directement du spectrophotomètre grâce au port USB présent sur le bord gauche de la borne de l'écran. De là vous pourrait confortablement poursuivre le traitement de vos donnés sur votre propre terminal. </p>

#####  **Interface** 

Une fois la machine opérationnel, une fenêtre avec 6 icônes apparait. Pour effectuer vos mesures, appuyez sur l'icône **Applications**, plusieurs options s'offre à vous :

- - **Longueur d'onde unique**  Mesure l'absorbance à une longueur d'onde spécifique.
    - **Balayage de spectre** Mesure l'absorbance entre 2 longueur d'onde choisi par l'utilisateur entre 190 et 1100 nm.
    - **Cinétique** Mesure simultanément plusieurs absorbance sur le temps.
    - **Courbe étalon** Mesure de la concentration à une longueur d'onde donné par la génération d'une courbe de calibration standardisé.
    - **Éditeur d'équation** Méthode de mesure personnalisé.
- [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-05/scaled-1680-/92Zimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-05/92Zimage.png)

#### **TEST**  


Pour effectuer un test du spectrophotomètre on peut utiliser **l'érythrosine et le vert de méthyle**, qui sont des colorants <span data-carac-value="L'érythrosine est un colorant rouge de synthèse, autorisé uniquement pour colorer les cerises en conserve et les cerises décorant les cocktails. Une étude menée chez l’animal a montré une induction de tumeur à la tyroïde de rongeurs mais celle-ci a été jugée non pertinente chez l'humain par les autorités sanitaires du fait de différences physiologiques entre les deux espèces.">de synthèse</span> <span data-carac-value="L'érythrosine est un colorant rouge de synthèse, autorisé uniquement pour colorer les cerises en conserve et les cerises décorant les cocktails. Une étude menée chez l’animal a montré une induction de tumeur à la tyroïde de rongeurs mais celle-ci a été jugée non pertinente chez l'humain par les autorités sanitaires du fait de différences physiologiques entre les deux espèces.">rouge et vert respectivement </span>souvent utilisés comme standard dans des expériences de spectrophotométrie. Ils sont très soluble dans l'eau . Le **pic d'absorbance de l'érythrosine est de <span title="5 300 Å ou 565 646 GHz ou 18 868 cm⁻¹ ou 0 J ou 225,71 kJ/mol ou 2,339 eV">530 nm</span>** dans l'eau.

#### Matériel et Réactifs

1. **Érythrosine** (colorant alimentaire rouge)
2. **Solvant** ( l'eau distillée)
3. **Cuves de spectrophotométrie** et **verrerie de laboratoire** (béchers, fioles jaugées)

#### Préparation des Solutions

- **Préparer la solution mère d'Érythrosine** :
    
    
    - Dissolvez une quantité précise d'Érythrosine dans de l'eau distillée pour obtenir une concentration connue de la **solution mère à 0,1 mg/mL** .
- **Préparer une série de solutions diluées et la solution de blanc :** :
    
    
    - Préparez une série des solutions de concentrations décroissantes (par exemple, on a pris des solutions de **0,01 mg**/mL, 0.001 mg/mL ) en diluant la solution mère. Ces solutions serviront à établir une courbe d'étalonnage.
    - Utilisez de l'eau distillée comme solution de blanc.
- **Remplir les cuves** :
    
    
    - Remplissez chaque cuve avec les différentes solutions préparées : une cuve pour la solution de blanc, et les autres cuves pour les solutions d'Érythrosine de différentes concentrations.
- **Placer les cuves dans le spectrophotomètre** :
    
    
    - Placez chaque cuve dans le compartiment de l'échantillon du spectrophotomètre
- **Calibrer le spectrophotomètre** :
    
    
    - Utilisez la solution de blanc pour calibrer le spectrophotomètre en appuyant sur le bouton "**Take Reference**". Cela permettra d'établir la référence zéro.
    
    #### Préparation de la solution aqueuse du vert de méthyle
    
    #### Matériel et réactifs
    
    <div class="flex flex-grow flex-col max-w-full"><div class="min-h-[20px] text-message flex flex-col items-start whitespace-pre-wrap break-words [.text-message+&]:mt-5 juice:w-full juice:items-end overflow-x-auto gap-3" data-message-author-role="assistant" data-message-id="84bb9b36-21ff-4be6-b56f-7cd17c24c3b8" dir="auto"><div class="markdown prose w-full break-words dark:prose-invert dark">
    - Balance de précision
    - Pigment de vert de méthyle
    - Eau distillée
    - Pipettes
    - Fioles jaugées de 100 ml
    
    </div></div></div>#### Protocole
    
    <div class="flex flex-grow flex-col max-w-full"><div class="min-h-[20px] text-message flex flex-col items-start whitespace-pre-wrap break-words [.text-message+&]:mt-5 juice:w-full juice:items-end overflow-x-auto gap-3" data-message-author-role="assistant" data-message-id="84bb9b36-21ff-4be6-b56f-7cd17c24c3b8" dir="auto"><div class="markdown prose w-full break-words dark:prose-invert dark">
    1. **Pesée du pigment**:
        
        
        - Peser précisément 10 mg de pigment de vert de méthyle à l'aide d'une balance de précision.
    2. **Préparation de la solution mère**:
        
        
        - Dissoudre les 10 mg de pigment dans 100 ml d'eau distillée.
        - La concentration massique de cette solution mère est de 0,01 mg/ml.
    3. **Dilution de la solution mère**:
        
        
        - La solution obtenue est très concentrée. Pour obtenir une solution moins concentrée, procéder à une dilution au dixième.
        - Prélever 1 ml de la solution mère (0,01 mg/ml) et ajouter 9 ml d'eau distillée.
        - La concentration de la solution diluée est alors de 0,001 mg/ml.
    4. **Préparation des solutions étalons**:
        
        
        - Réaliser des dilutions en série pour obtenir une gamme de solutions avec des concentrations différentes à partir de la solution mère.
        - Conserver les concentrations suivantes : 
            - Solution mère : 0,01 mg/ml
            - Première dilution (C1) : 0,001 mg/ml
            - Deuxième dilution (C2) : 0,0001 mg/ml
    
    </div></div></div>Ces étapes permettent de préparer des solutions de vert de méthyle avec des concentrations précises pour diverses applications analytiques.
    
    <div class="mt-1 flex gap-3 empty:hidden juice:-ml-3"><div class="-ml-1 mt-0 flex h-7 items-center justify-center gap-[2px] self-end text-gray-400 lg:justify-start lg:self-center visible">  
    </div></div>

#### **Mesures et Analyses**

##### **Mode WAVESCAN - Balayage de spectre** 

Ce mode permet la mesure de l'absorbance <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">ou du % de transmission d'un échantillon</span></span></span> **entre 2 longueurs d'onde** choisi entre 190 et 1100 nm pour accéder à des <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">**longueurs d'onde maximales** ou l'échantillon absorbe le plus fortement. C'</span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">est une des caractéristiques physiques les plus utiles d'un composé, à la fois comme moyen d'identification </span></span><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">(analyse qualitative) et d’estimation (analyse quantitative).</span></span> </span>

<span style="color: rgb(132, 63, 161);">**<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">PARAMÈTRES DE MESURE </span></span></span>**</span>

<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Pour ce mode de mesure, sélectionnez l'option **WAVESCAN** parmi des applications. Utilisez **Max Wavelength** et **Min Wavelength** pour définir la plage de longueurs d'onde requise (pour des colorants on choisit la plage entre **400** nm et **800** nm ).</span></span></span>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/6iLimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/6iLimage.png)

<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">Vous pouvez passer à l'écran suivant à tout moment en appuyant sur la flèche avant et revenir à l'écran précédent en appuyant sur la flèche retour. <span class="jCAhz JxVs2d">Cet écran de paramètres de mesure permet à l'utilisateur de définir les paramètres suivants : </span></span></span></span>

- - - <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d">**Feature Detection** - Détection de caractéristiques (détermine le nombre de pics ou vallées) </span></span></span></span>
        - <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d">**Feature Type** - Type de caractéristique (les options sont des pics ou des vallées) </span></span></span></span>
        - <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d">**Feature Sort** - Tri des fonctionnalités : ( longueur d'onde ou amplitude)</span></span></span></span>
        - <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d"> **Draw Peaks** - Active et désactive l'affichage des curseurs de pic.</span></span></span></span>
        - <span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb"><span class="jCAhz JxVs2d">**Custom Peak Height** et **Custom Peak Width**: affiché uniquement si la détection des fonctionnalités est définie sur Personnalisé.  
            </span></span></span></span>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/JgAimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/JgAimage.png)

<span style="color: rgb(132, 63, 161);">**<span class="HwtZe" lang="fr"><span class="jCAhz JxVs2d ChMk0b"><span class="ryNqvb">PRISE DE MESURE</span></span></span>**</span>

Pour prendre une mesure, insérez une cuve contenant le solution de référence (de l'eau distillée) dans le porte-cuve de référence (en haut de l'appareil) et des cuves contenant l'échantillon dans les supports.

<p class="callout info">Attention : l'emplacement de l’échantillon numéro 1 est situé vers le bas de l'appareil. </p>

[![image.jpeg](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/image.jpeg)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/image.jpeg)

Appuyez sur le bouton de<span style="color: rgb(186, 55, 42);"> **prise de mesure**</span>.

 **[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/Vykimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/Vykimage.png)**

**La mesure de référence sera automatiquement soustraite de la mesure de l'échantillon.** L'écran affichera un tableau sous l'analyse avec les paramètres mésures. Pour ajouter manuellement un pic ou une vallée au tableau, placez le curseur sur la caractéristique souhaitée en touchant la caractéristique ou en utilisant les curseurs gauche et droit et appuyez sur une cellule vide du tableau.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/TVIimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/TVIimage.png)

##### **Mode SINGLE WAVELENGT - Longueur d'onde unique** 

L'application Single Wavelength permet d'effectuer des mesures simples d'absorbance (A) et de pourcentage de transmission (%T) sur des échantillons, en mesurant la quantité de lumière qui a traversé l'échantillon par rapport à la longueur d'onde par rapport à une référence.

<span style="color: rgb(132, 63, 161);">**PARAMÈTRES DE MESURE**</span>  
Régler le mode sur Absorbance ou %T. La longueur d'onde, le temps d'intégration et le mode lampe peuvent être réglés selon les besoins. Le nom de l'échantillon ***(Sample Seed***) saisi sous ***Sample*** sera le nom de fichier utilisé pour tout fichier de données sauvegardé automatiquement.

<span style="color: rgb(132, 63, 161);">**EFFECTUER UNE MESURE**</span>

Pour prendre une mesure, insérez une cuve contenant le solution de référence (de l'eau distillée) dans le porte-cuve de référence (en haut de l'appareil) et des cuves contenant l'échantillon dans les supports. Appuyez sur le bouton de<span style="color: rgb(186, 55, 42);"> **prise de mesure**</span>. **La mesure de référence sera automatiquement soustraite de la mesure de l'échantillon.**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/xnGimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/xnGimage.png)

L’écran affichera le paramètre mesuré sur votre échantillon (vérifier bien que le régime "*monocuve*" est choisi pour conduire la mesure sur un seul échantillon).

### Utilisation du logiciel Spectro

##### **Lancement**

  
Une fois démarré, le logiciel devrait détecter automatiquement le spectrophotomètre Libra S60.  
Si ce n'est pas le cas, allez dans le menu "Paramètres" ou "Appareil" et sélectionnez manuellement le Libra S60 dans la liste des appareils disponibles.

##### **Navigation**

Le menu de l'application s'ouvre en cliquant sur [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/npYimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/npYimage.png)

**Resolution** comporte quatre onglets principaux qui permettent d'accéder à toutes les options de l'application.

- **Setup** - Configuration. Contient des boutons pour les tâches courantes (par exemple : copier, coller, options d'affichage des courbes, etc.).

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/4eUimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/4eUimage.png)

- **Applications - Affiche les différents types de mesure qu'il est possible de réaliser

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/zXHimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/zXHimage.png)

- **User Methods** - Méthodes utilisateur
- **Help** -Donne accès au manuel détaillé sur l'utilisation du logiciel

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/i6Bimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/i6Bimage.png)

Lorsque les fichiers de données contiennent des informations graphiques (par exemple, Quick Scan, Wavelength Scan,  
les données sur les étalons en analyse quantitative et en cinétique), il existe des options de manipulation des données  
de données graphiques.

- Outils graphiques : Design
- Outils graphiques : **Layout** - Mise en page


#### <span style="color: rgb(22, 145, 121);">**Applications**</span>

Les applications de mesure suivantes sont disponibles :

- **Applications rapides :**

<details id="bkmrk-quick-read-balayage-"><summary>Quick Read</summary>

Balayage de base de l'échantillon qui vous permet d'effectuer un contrôle rapide de l'échantillon à une longueur d'onde spécifiée et de déterminer une valeur de concentration rapide en utilisant un facteur prédéfini.

Pour effectuer une lecture rapide d'une acquisition :  
1\. Affichez la fenêtre Quick Read  
2\. Sélectionnez l'onglet Acquire

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/EgHimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/EgHimage.png)

3\. Entrer la longueur d'onde pour laquelle la lecture rapide doit être effectuée.  
<span style="text-decoration: underline;">Si la longueur d'onde est réglée en dehors de la plage autorisée pour le banc optique actuel, elle est automatiquement changée pour la limite de ce banc optique.</span>  
4\. Sélectionnez le mode d'acquisition ( Absorbance ou transmission) et autres des autres paramètres que vous souhaitez régler.

5.Cliquez sur **Prendre la référence [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/LDgimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/LDgimage.png)ou ALT, Q, R**. Une référence est utilisée pour toutes les acquisitions d'échantillons ultérieures dans la session en cours.  
6\. Cliquez sur **Start** [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/qfoimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/qfoimage.png) (Démarrer) ou **ALT, Q, S**  
L'acquisition est lancée, avec la dernière lecture et tous les échantillons précédents et l'historique de référence affichés dans la fenêtre.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/wmPimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/wmPimage.png)

**Dénomination des échantillons :**  
1\. Cliquez sur **Sample Naming**   
2\. Sélectionnez la méthode de désignation. Les options sont les suivantes

- **Automatic naming** - L'échantillon et toutes les références acquises sont nommés en fonction de la série et du nombre spécifiés.
- **Prompt for name** - Vous serez demandé d'entrer le nom de l'échantillon pour chaque référence et chaque échantillon avant l'acquisition.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/6GDimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/6GDimage.png)

3\. Cliquez sur **OK**

**Conversion de concentration :**  
1\. Cochez l'option **Enable** (Activer) dans le module **Concentration** (n'est disponible que si le mode est réglé sur Absorbance.)  
2\. Saisir un facteur de concentration

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/53Vimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/53Vimage.png)

Pour configurer les paramètres de concentration cliquez sur le lanceur de la boîte de dialogue **Concentration.**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/3SPimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/3SPimage.png)

Cochez l'option Enable (Activer) et sélectionnez le type de concentration et les unités de concentration et cliquez sur **OK.**

**Effacer l'affichage :**  
1\. Sélectionnez le bouton **Acquire**.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/bgjimage.png) ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/bgjimage.png)

2\. Cliquez sur Clear History (Effacer l'historique)  
3\. Cliquez sur **Yes** sur l'onglet

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/2Ubimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/2Ubimage.png)

L'affichage des résultats est effacé

</details><details id="bkmrk-quick-scan-l%27applica"><summary>Quick Scan</summary>

L'application **Quick Scan** vous permet d'effectuer un contrôle qualitatif rapide de l'échantillon et de surveiller l'échantillon pour déterminer sa stabilité.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/Cotimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/Cotimage.png)

**Utilisation de Quick Scan**  
1\. Afficher la fenêtre d'analyse rapide

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/oOGimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/oOGimage.png)

2\. Sélectionnez l'onglet **Acquire** et entrez les longueurs d'onde **Low** et **High** pour définir la plage sur laquelle effectuer le balayage rapide  
<span style="text-decoration: underline;">Si la longueur d'onde basse ou haute est réglée en dehors de la plage autorisée pour le banc optique actuel, elle est automatiquement remplacée par la limite pour ce banc optique.</span>

  
3\. Sélectionnez **Interval** parmi les options disponibles dans la liste déroulante.  
( la plage de balayage sélectionnée doit être divisible par l'intervalle sélectionné pour que les réglages soient valides )  
4\. Sélectionnez la largeur de bande, le mode d'acquisition, la vitesse de balayage et la longueur du chemin.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/kDKimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/kDKimage.png)

5.Cliquez sur **Prendre la référence [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/LDgimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/LDgimage.png)ou ALT, Q, R**. Une référence est utilisée pour toutes les acquisitions d'échantillons ultérieures dans la session en cours.  
6\. Cliquez sur **Start** [![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/qfoimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/qfoimage.png) (Démarrer) ou **ALT, Q, S.**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/kJpimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/kJpimage.png)

Après l'acquisition, vous pouvez visualiser les données de référence acquises et identifier les caractéristiques des spectres. Vous pouvez également utiliser les différents outils d'affichage et de manipulation graphiques.

**Dénomination des échantillons :**  
1\. Cliquez sur **Sample Naming**   
2\. Sélectionnez la méthode de désignation. Les options sont les suivantes

- **Automatic naming** - L'échantillon et toutes les références acquises sont nommés en fonction de la série et du nombre spécifiés.
- **Prompt for name** - Vous serez demandé d'entrer le nom de l'échantillon pour chaque référence et chaque échantillon avant l'acquisition.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/6GDimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/6GDimage.png)

3\. Cliquez sur **OK**

**L'acquisition en continu :**

1. Cochez l'option **Enable** dans le **Monitor**
2. Saisissez un intervalle (en secondes) est le temps entre le début d'une acquisition et le début de la suivante.  
    Pour prendre des spectres consécutifs avec un délai minimal entre la fin d'une acquisition et le début de la suivante, réglez l'intervalle sur '0'.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/IZWimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/IZWimage.png)

**Spécifier le nombre de superpositions :**  
Utilisez la commande **"Overlay spin-control"** pour configurer le nombre de superpositions à afficher  
<span style="text-decoration: underline;">La valeur "0" indique qu'une seule trace sera affichée sans superposition.</span>  
Pour effacer toutes les superpositions en cours, cliquez sur **Clear (Effacer).**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/B8Rimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/B8Rimage.png)

**Enregistrer les résultats de l'analyse rapide :**  
Vous pouvez enregistrer les résultats de l'analyse rapide une fois que l'acquisition a été arrêtée.

#### <span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="16:12" style="white-space: pre-wrap;">Manipulation</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="6:4" style="white-space: pre-wrap;">Rapide des Données d'Analyse</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span>

<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="32:4" style="white-space: pre-wrap;">[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/8Bjimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/8Bjimage.png)</span>

**<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="32:4" style="white-space: pre-wrap;">- Pour visualiser</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="51:6" style="white-space: pre-wrap;">les courbes</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="41:9" style="white-space: pre-wrap;">de référence</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="58:4" style="white-space: pre-wrap;">avec</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="76:4" style="white-space: pre-wrap;">les données</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="67:8" style="white-space: pre-wrap;">acquises</span><span style="white-space: pre-wrap;">: </span>**

1. <span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="85:6" style="white-space: pre-wrap;">Sélectionnez</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="103:3" style="white-space: pre-wrap;">l'onglet</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span>**<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="96:6" style="white-space: pre-wrap;">Format</span>**
2. <span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="110:10" style="white-space: pre-wrap;">Cliquez sur</span>**<span style="white-space: pre-wrap;"> Show References</span>**

<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="191:73" style="white-space: pre-wrap;">[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/rQWimage.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/rQWimage.png) </span>

<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="191:73" style="white-space: pre-wrap;">La ou les références correspondent aux données acquises sont affichées sur l'afficheur.</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="265:3" style="white-space: pre-wrap;">Les</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="269:6" style="white-space: pre-wrap;">l'ordre des légendes</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="282:7" style="white-space: pre-wrap;">reflète</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="290:3" style="white-space: pre-wrap;">l'</span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="294:11" style="white-space: pre-wrap;">ordre d'acquisition</span><span style="white-space: pre-wrap;">. </span>

<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="328:4" style="white-space: pre-wrap;">- Pour trouver</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="333:22" style="white-space: pre-wrap;">automatiquement les caractéristiques</span>

1. <span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="85:6" style="white-space: pre-wrap;">Sélectionnez</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="103:3" style="white-space: pre-wrap;">l'onglet</span><span style="white-space: pre-wrap;"> </span>**<span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="96:6" style="white-space: pre-wrap;">Format</span>**
2. <span class="EzKURWReUAB5oZgtQNkl" data-src-align="110:10" style="white-space: pre-wrap;">Cliquez sur </span>**Find Features**

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/scaled-1680-/Yg9image.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2024-06/Yg9image.png)

</details><p class="callout info">NB :  
- Il n'est pas possible de modifier les paramètres d'acquisition lorsque l'acquisition des données est en cours  
- Si la longueur d'onde, le mode ou la largeur de bande sont modifiés, une nouvelle référence est nécessaire.  
( Start ne sera pas sélectionnable).  
- Lorsqu'une acquisition est lancée après avoir modifié l'un des paramètres, les résultats précédents affichés dans la fenêtre sont supprimés. Si vous souhaitez conserver les résultats actuellement affichés, vous devez les sauvegarder avant de lancer l'acquisition.</p>

- **Applications :**  
    o **Longueur d'onde fixe** - Mesure de l'absorbance ou du %T à 1 à 10 longueurs d'onde différentes  
    o **Balayage de longueur d'onde** - Réalisation d'un balayage d'échantillon, manipulation et comparaison de spectres  
    o **Analyse quantitative** - Mesure de l'absorbance et détermination de la concentration à l'aide de courbe étalon. Permet des mesures à plus d'une longueur d'onde et plus d'une courbe de concentration pour déterminer des courbes à longueurs d'onde multiples.  
    o **Cinétique** - Absorbance en fonction du temps

#### Instructions pour la prise de mesure d'absorbance

#### Matériel et réactifs

<div class="flex flex-grow flex-col max-w-full" id="bkmrk-spectrophotom%C3%A8tre-cu"><div class="min-h-[20px] text-message flex flex-col items-start whitespace-pre-wrap break-words [.text-message+&]:mt-5 juice:w-full juice:items-end overflow-x-auto gap-3" data-message-author-role="assistant" data-message-id="db4102e2-1d39-4ddd-afe1-0d8ce264e301" dir="auto"><div class="markdown prose w-full break-words dark:prose-invert dark">- Spectrophotomètre
- Cuvettes
- Solution de référence (zéro)
- Solution d'échantillon

</div></div></div>#### Protocole

<div class="flex flex-grow flex-col max-w-full" id="bkmrk-pr%C3%A9paration-des-cuve"><div class="min-h-[20px] text-message flex flex-col items-start whitespace-pre-wrap break-words [.text-message+&]:mt-5 juice:w-full juice:items-end overflow-x-auto gap-3" data-message-author-role="assistant" data-message-id="db4102e2-1d39-4ddd-afe1-0d8ce264e301" dir="auto"><div class="markdown prose w-full break-words dark:prose-invert dark">1. **Préparation des cuvettes**:
    
    
    - Remplir une cuvette avec la solution de référence (zéro).
    - Remplir une autre cuvette avec la solution dont l'absorbance doit être mesurée.
2. **Insertion des cuvettes**:
    
    
    - Insérer la cuvette contenant la solution de référence dans la cellule de référence isolée du spectrophotomètre.
    - En même temps, insérer la cuvette contenant la solution d'échantillon dans la cellule de mesure.
3. **Prise de mesure**:
    
    
    - Appuyer sur le bouton "take measurement" pour lancer la mesure.
    - La mesure de référence sera automatiquement soustraite de la mesure de l'échantillon, assurant ainsi une mesure précise de l'absorbance de l'échantillon.
4. **Mesure d'un seul échantillon**:
    
    
    - Si vous souhaitez effectuer une mesure d’un seul échantillon, réglez le paramètre "monocuve - oui" sur le spectrophotomètre.

</div></div></div>#### **Note** 

- **Pour votre sécurité, n'ouvrez pas la machine pendant utilisation.**