# Bioluminescence en fonction de chaque paramètre

**1) Protocole expérimental**

- On a lancé des cultures avec la suspension mère du 09/05/2025
- Pour ce faire on a mis : 200µL de la suspension mère dans 10mL de milieu.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/GmGimage.png) ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/GmGimage.png)[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/UD8image.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/UD8image.png)

On a laissé incuber les cultures 16h à température ambiante dans la réserve. On a ensuite transféré 250µL dans les puits des microplaques. On a ensuite mesuré la bioluminescence exprimé en RLU ( Relative light unit) avec le lecteur de plaque luminomètre BertholdTech TriStar2S.

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/dNLimage.png) ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/dNLimage.png)[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/Z14image.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/Z14image.png)

**2) Résultats**

<table border="1" id="bkmrk-echantillon%C2%A0-mesure-" style="border-collapse: collapse; width: 100%; height: 184.383px;"><colgroup><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col></colgroup><tbody><tr style="height: 29.8px;"><td style="height: 29.8px;">**Echantillon** </td><td style="height: 29.8px;">**Mesure 1 (RLU)** </td><td style="height: 29.8px;">**Mesure 2 (RLU)** </td><td style="height: 29.8px;">**Mesure 3 (RLU)** </td><td style="height: 29.8px;">**moyenne**</td></tr><tr style="height: 35.3833px;"><td style="height: 35.3833px;">**Sel marin** </td><td style="height: 35.3833px;">44845504

</td><td style="height: 35.3833px;">46015056</td><td style="height: 35.3833px;">46768168</td><td style="height: 35.3833px;">45 876 243</td></tr><tr style="height: 29.8px;"><td style="height: 29.8px;">**NaCl 10g/L**</td><td style="height: 29.8px;">235183</td><td style="height: 29.8px;">112455</td><td style="height: 29.8px;">1790293</td><td class="align-left" style="overflow: hidden; padding-top: 2px; padding-right: 3px; padding-bottom: 2px; vertical-align: bottom; text-align: right; height: 29.8px;">712643,6667</td></tr><tr style="height: 29.8px;"><td style="height: 29.8px;">**NaCl 20 g/L**</td><td style="height: 29.8px;">60977620</td><td style="height: 29.8px;">60070600</td><td style="height: 29.8px;">58558968</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right; height: 29.8px;">59869062,67</td></tr><tr style="height: 29.8px;"><td style="height: 29.8px;">**NaCl 30 g/L**</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;"> </td></tr><tr style="height: 29.8px;"><td style="height: 29.8px;">**NaCl 40 g/L**</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;">Overload</td><td style="height: 29.8px;">  
</td></tr></tbody></table>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/MOiimage.png) Figure 1 : La bioluminescence en fonction de la concentration de la NaCl](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/MOiimage.png)

<table border="1" id="bkmrk-echantillon%C2%A0-mesure--1" style="border-collapse: collapse; width: 100%; height: 179.781px;"><colgroup><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col></colgroup><tbody><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Echantillon** </td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 1 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 2 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 3 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**moyenne** </td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Sans glycérol** </td><td style="height: 29.7969px;">33247172</td><td style="height: 29.7969px;">32239560</td><td style="height: 29.7969px;">33735476</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">33074069,33</td></tr><tr style="height: 30.7969px;"><td style="height: 30.7969px;">**Glycérol 3g/L**</td><td style="height: 30.7969px;">42860224</td><td style="height: 30.7969px;">42131648</td><td style="height: 30.7969px;">40296944</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">41762938,67</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Glycérol 4g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">45816200</td><td style="height: 29.7969px;">45822756</td><td style="height: 29.7969px;">47212044</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">46283666,67</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Glycérol 5g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">30895180</td><td style="height: 29.7969px;">31607086</td><td style="height: 29.7969px;">32870984</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">31791083,33</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Glycérol 6g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">46946548</td><td style="height: 29.7969px;">43893304</td><td style="height: 29.7969px;">43641736</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">44827196</td></tr></tbody></table>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/DE9image.png) Figure 2 : La bioluminescence en fonction de la concentration du glycérol ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/DE9image.png)

<table border="1" id="bkmrk-echantillon-mesure-1" style="border-collapse: collapse; width: 100%; height: 176.8px;"><colgroup><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col></colgroup><tbody><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Echantillon**</td><td style="height: 29.4667px;">**Mesure 1 (RLU)** </td><td style="height: 29.4667px;">**Mesure 2 (RLU)** </td><td style="height: 29.4667px;">**Mesure 3 (RLU)** </td><td style="height: 29.4667px;">**moyenne** </td></tr><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Sans asparagine** </td><td style="height: 29.4667px;">32419202</td><td style="height: 29.4667px;">35136032</td><td style="height: 29.4667px;">31284540</td><td style="height: 29.4667px;"><span data-sheets-root="1" style="font-size: 10pt; font-family: Arial; font-style: normal; text-align: right;">32946591,33</span></td></tr><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Asparagine 20g/L**</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td></tr><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Asparagine 30g/L**</td><td style="height: 29.4667px;">62468408</td><td style="height: 29.4667px;">58194472</td><td style="height: 29.4667px;">59331008</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">59997962,67</td></tr><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Asparagine 40g/L**</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td></tr><tr style="height: 29.4667px;"><td style="height: 29.4667px;">**Asparagine 50g/L**</td><td style="height: 29.4667px;">Overload</td><td style="height: 29.4667px;">62883208</td><td style="height: 29.4667px;">49083528</td><td style="height: 29.4667px;">/</td></tr></tbody></table>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/TCfimage.png) Figure 3 : La bioluminescence de la bactérie en fonction de la concentration en asparagine ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/TCfimage.png)

<table border="1" id="bkmrk-echantillon-mesure-1-1" style="border-collapse: collapse; width: 100%; height: 178.781px;"><colgroup><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col><col style="width: 20.0165%;"></col></colgroup><tbody><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Echantillon**</td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 1 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 2 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**Mesure 3 (RLU)** </td><td style="height: 29.7969px;">**moyenne**</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Sans tryptone** </td><td style="height: 29.7969px;">31655116</td><td style="height: 29.7969px;">32114984</td><td style="height: 29.7969px;">30762482</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">31510860,67</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Tryptone 20g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">39209212</td><td style="height: 29.7969px;">39168668</td><td style="height: 29.7969px;">43397976</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">40591952</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Tryptone 30g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">51469600</td><td style="height: 29.7969px;">57521668</td><td style="height: 29.7969px;">57203196</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">55398154,67</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Tryptone 40g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">44447328</td><td style="height: 29.7969px;">47998668</td><td style="height: 29.7969px;">47332372</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">46592789,33</td></tr><tr style="height: 29.7969px;"><td style="height: 29.7969px;">**Tryptone 50g/L**</td><td style="height: 29.7969px;">42574080</td><td style="height: 29.7969px;">43918224</td><td style="height: 29.7969px;">40970844</td><td style="overflow: hidden; padding: 2px 3px 2px 3px; vertical-align: bottom; text-align: right;">42487716</td></tr></tbody></table>

[![image.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/scaled-1680-/ui3image.png) Figure 4 : La bioluminescence de la bactérie en fonction de la concentration de tryptone. ](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-05/ui3image.png)

**3) Discussion**

Nous avons obtenu des valeurs globalement très élevé en URL ( de l'ordre de 10^7 URL) alors que dans la littérature c'est dans l'ordre de 10^6 . Il faut préalablement dilué nos échantillons et mettre un volume plus petit (150-200µL) pour pouvoir quantifier la bioluminescence et éviter la surcharge. De plus, il faut faire un témoins négatif (eau distillé) pour avoir une valeur de référence sans bioluminescence. les conditions favorables pour la bioluminescence de la bactérie c'est 20g/L d'asparagine, 30gl/L de NaCl, 30g/L de tryptone et 4g/L de glycérol ce qui correspond à ce que l'on voit dans la littérature. Pour le NaCl, on observe qu'à 10g/L, il n'y a aucune bioluminescence mais à partir de 20g/L, la bioluminescence est plus élevée qu'avec le sel marin . Pour le glycérol , il semblerait qu'une concentration à 4g/L et légèrement plus favorable à la bioluminescence qu'à 3g/L. Nous avons observé préalablement qu'entre 0 et 10g/L d'asparagine, il n'y a pas d'influence sur la bioluminescence. En revanche, 20g/L d'asparagine suffit pour voir une intensité nettement plus élevée de la bioluminescence.