# L-Asparagine vs peptone : effets sur la croissance et la bioluminescence ### **Introduction** Dans de nombreux articles scientifiques portant sur les espèces du genre *Photobacterium*, l’utilisation de peptone est souvent préférée à celle de la L-Asparagine dans la préparation des milieux de culture. Afin de comparer l’impact de ces deux composés, nous allons étudier deux colonies d’une même espèce de *Photobacterium* cultivées dans deux milieux différents. Ces milieux reprennent la composition décrite dans la page de référence sur les paramètres de culture. - Le milieu 1 suit exactement cette composition, avec de la L-Asparagine (10g/L). - Le milieu 2 en diffère uniquement par le remplacement de la L-Asparagine par de la peptone, dans les mêmes proportions (10g/L) Nous procéderons d’abord à une analyse spectrométrique d’absorption, puis à une analyse de luminescence afin d’évaluer les différences éventuelles de croissance et d’activité métabolique entre les deux conditions. ### **Protocole:** Nous préparons deux échantillons: - Dans l'échantillon 1, on introduit 200 µl de culture de bactéries et 10 ml du milieu 1 - Dans l'échantillon 2, on introduit 200 µl de culture de bactéries et 10 ml du milieu 2 Nous introduisons ensuite les échantillons dans des cuves de spectrométrie. Deux cuves supplémentaires, contenant respectivement uniquement le milieu 1 et uniquement le milieu 2, servent de blancs pour les mesures d’absorbance de leur échantillon associé. L’heure d’inoculation est notée, et des mesures d’absorbance sont réalisées toutes les heures, à partir de 1 heure après l’inoculation. ### **Résultats:** On note : - **A₁** : l’absorbance de l’échantillon 1 (milieu avec L-Asparagine) - **A₂** : l’absorbance de l’échantillon 2 (milieu avec peptone)

Temps (heures)	**A₁ (UA)**	**A₂ (UA)**
1	0.118	0.094
2	0.151	0.146
3	0.206	0.216
5	0.367	0.464
6	0.417	0.565
7	0.452	0.608
8	0.481	0.663

Pour la facilité de lecture, les données sont tracées sur le graphe suivant:**[![Figure_1.png](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-07/scaled-1680-/figure-1.png)](https://wiki.fablab.sorbonne-universite.fr/BookStack/uploads/images/gallery/2025-07/figure-1.png)** ### **Intensité de bioluminescence après 7h:** La mesure à été faite sur le luminomètre Berthold Sirius FB12. Nous faisons les mesures à 3 reprises pour chaque échantillon: - Sans dilution - Dilué au 10e A blanc, on obtient une valeur autour de 21 RLU/s. Les échantillons non dilués provoquent un overload de l'appareil, d'où la nécessité de faire des échantillons dilués. Pour les échantillons dilués au 10e, nous obtenons les valeurs suivantes: - L'échantillon 1 (L-Asparagine) : 1,961,614 RLU/s - L'échantillon 2 (Peptone) : 3,247,180 RLU/s