Petits projets

Petits projets divers en biologie végétal, ouvert à tous

• Pot avec boxes.py
• Lombricomposteur
• Quadra 1x1m
• Lames de BV carte blanche 2024 (S6)
• Évènement carte blanche 2024 Symbiose6
• Dosage des chlorophylles

Pot avec boxes.py

J'ai utilisé le générateur de boite boxes.py, comme conseillé dans un tutoriel du wiki, en donnant les dimensions voulues. J'ai ensuite vectorisé sur Inkscape et colorisé les trajets en rouge.

résultat :

Lombricomposteur

Quadra 1x1m

Réalisation de quadras d’1x1m en bois et quadrillé pour une étude écologique de la diversité spécifique au sol du couvert végétal à Fontainebleau.

 

Lames de BV carte blanche 2024 (S6)

Réalisation de lames de biologie végétale pour l'évènement carte blanche des associations le 21 mars 2024

Évènement carte blanche 2024 Symbiose6

Réalisation de lames de biologie végétale pour l'évènement carte blanche des associations le 21 mars 2024

À cette occasion, nous avons réalisé des coupes transversales de tiges, feuilles et racines (même si ces dernières non pas données de résultats satisfaisants), ainsi que des coupes longitudinales de feuilles. 

Pour cela, nous avons utilisé différents végétaux monocotylédones (Alocasia Zébrina, Monstera Adansonii, Calathea Rufibarba, …) et dicotylédones (lierre principalement) ainsi que différentes colorations (bleu de Toluidine et carmin-vert d’iode). Nous avons observé nos coupes grâce à un microscope optique (généralement x40) et à la caméra présente au FabLab que nous avions bien-sûr branché sur la télé présente sur place.

Dans un premier temps, nous avons fait des coupes très fines de tiges, racines et feuilles grâce à une lame de rasoir.

Dans un cas, nous avons coloré directement grâce au Bleu de Toluidine nos coupes transversales, en les plongeant dans un bain durant quelques minutes (entre 2 et 3 minutes). Puis, nous avons rincé dans un bain d’eau distillé nos coupes colorées et les avons observé dans une goutte d’eau entre lame et lamelle. (Voir photo 1)

Dans un autre cas, nous avons tenté une coloration au carmin-d’iode de nos coupes transversales. Nous avons plongé nos coupes dans un bain d’eau de Javel, puis nous les avons rincé, à la suite nous les avons passé dans un bain d’acide acétyle et ensuite dans le colorant durant 1 à 2 minutes, avant de finir par un rinçage à l’eau distillé. Nous avons ensuite observé de la même manière que pour la coloration au Bleu de Toluidine. (Voir photos 2 et 3)

Dans un dernier cas, nous avons coupé de façon longitudinale une feuille. Nous avons donc pris la partie inférieure d’une feuille et nous avons essayé de « décoller » la partie la plus proche de l’épiderme de la feuille. Nous avons ensuite mis la partie inférieure de la feuille sur une lame avec un montage dans une goutte d’eau et entre lame et lamelle que nous avons observé au microscope. (Voir photo 4)

Photo 1 : coupe transversale d’une tige de Calathea Rufibarba au bleu de Toluidine

 

Photo 2 : coupe transversale d’une tige d’Alocasia Zébrina au carmin-vert d’iode ainsi que du montage expérimentale

Photo 3 : Coupe transversale d’une feuille de Calathea Rufibarba au carmin-vert d’iode

Photo 4 : coupe longitudinale d’une feuille d’Alocasia Zébrina (on y observe beaucoup de stomates)

Les critiques/points à améliorer :

• Nous n’avons pas réussi à conserver nos lames car nous n’avons pas encore trouvé le moyen pour éviter un dessèchement.
• Certains colorations ne sont pas encore complètement au point (nous ferons d’autres pages plus précise pour chaque coloration quand nous aurons un protocole précis)
• Nous n’avons pas réussi à identifier tout les tissus présents
• Les coupes de racine n’ont pas tenus car les racines utilisées étaient trop fines. Il faudrait soit trouver des végétaux avec des racines plus importantes soit réfléchir à une méthode pour les couper plus facilement sans abîmée notre coupe

Les expériences qui pourraient être également réalisées :

• Faire des coupes de succulentes ou cactus pour observer les tissus (voir s’il y a des différences significatives)
• Faire des coupes de fougères également pour les mêmes raisons
• Voir s’il y a des différences histologiques selon les nutriments apportés et leur concentration (par exemple en excès lorsque cela devient toxique pour la plante)
• Faire un tableau récapitulatif des différences significatives au niveau des tissus entre monocotylédones et dicotylédones et selon si le tissu vient de la tige, de la feuille ou de la racine.

Dosage des chlorophylles

Le dosage des chlorophylles A et B est une expérience simple et basique de biologie végétale, par exemple lorsque l'on étudie l'effet d'un paramètre du milieu (carence en fer, exposition, etc).

Nous profitons de l'écriture du wiki à propos du mélangeur/disperseur turrax pour donner un exemple d'utilisation ici.

Protocole : 

Nous cherchons à connaître la teneur en chlorophylle a et b de ces deux feuilles de tabac, l'une (celle de gauche) étant un peu plus âgée que l'autre :

 

Mesure de la masse pour ramener la concentration en chlorophylle de l'échantillon (mg.L^-1) à la teneur dans la feuille (mg.g^-1). (Mettre une coupelle pas comme sur les photos)

 

Débrancher l'appareil lors de la mise en place sur la potence. Porter des lunettes de protection, une blouse et s'attacher les cheveux.

 

La loi de beer lambert pour les deux longueurs d'onde, les concentrations des chlorophylles a et b ainsi que leur coefficient d'absorption spécifique nous permettes de poser le système d'équations ci-dessous :

Chla = 12,7 x A663 - 2,63 x A645      en mg.L^-1

Chlb = 22,9 x A645 - 4,68 x A663     en mg.L^-1

^{La teneur (mg de chlorophylle/g de feuille) est donnée par (concetration x dilution x volume extrait)/masse feuille}

	A645	A663	Concentration Chla	Concentration Chlb	masse	teneur Chla	teneur Chlb	Chla+Chlb
feuille 1	0,176	0,385	4,42662 mg.L-1	2,2286 mg.L-1	1,4895g	0,294mg/g	0,150mg/g	0,446mg/g
feuille 2	0,283	0,635	7,32021 mg.L-1	3,5089 mg.L-1	1,5796g	0,463mg/g	0,222mg/g	0,685mg/g