Extraction d'ADN de cellules végétales


 En biologie moléculaire, de nombreuses techniques se basent sur l'analyse et le traitement de l'ADN (Acide DesoxyriboNucléique), à ne pas confondre avec l'ARN (Acide RiboNucléique). 

C'est le cas de la Polymérase Chain Reaction (PCR), Southern Blot, utilisation d'enzymes de restriction, hybridation moléculaire...

Pour ce faire, il est nécessaire d'isoler l'ADN de son environnement (cellule, tissus) pour obtenir d'un échantillon pur et et quantité suffisante pour servir de base pour les techniques suivantes. 

Protocole d'extraction : [1] 

L'isopropanol provoque l'agrégation et la précipitation de l'ADN dans la solution.

Le Vortex est un matériel en biologie moléculaire pour mélanger des solutions notamment dans des microtubes. Il est composé d'un socle lourd ou se situe le moteur de l'appareil. Au-dessus, se trouve un réceptacle en caoutchouc ou l'on pose le tube a votexer. [2]

Précisions :

Le tampon d'extraction est habituellement préfabriqué, il sert à rompre les membranes cellulaires et nucléaires, maintenir un pH optimal tout au long de l’extraction n, sauvegarder l'intégrité de l'ADN et prévenir sa dégradation, Séparer l'ADN des débris cellulaires et des contaminants. [2]

 

Protocole de fabrication du tampon d'extraction de cellules végétales : [3]

 

Bibliographie :

[1] Extraction d'ADN génomique et amplification des gènes d'actine 2 et Cycline D des plantes Arabidopsis Thaliana et Tomates, Laboratoire de Physiologie Végétale,Université de Neuchâtel : https://www.unine.ch/files/live/sites/physiologievegetale/files/shared/documents/TP-PCR.pdf

[2] Vortex, Wikipédia : https://fr.wikipedia.org/wiki/Vortex_(biologie_mol%C3%A9culaire)

[3] Fabriquer et utiliser des tampons d'extraction ADN courants, Fourni-Labo : https://www.fourni-labo.fr/tutoriel/comment-fabriquer-et-utiliser-des-tampons-d-39-extraction-d-39-adn-courants-2023-08-19

 

 

 

 



Revision #3
Created 30 April 2024 12:02:04 by Turcios Maya
Updated 30 April 2024 13:26:19 by Turcios Maya