Test catalase

1) Intérêt

La recherche de la catalase présente un intérêt taxonomique en ce qui concerne les bactéries à Gram +.

2) Principe
La catalase est une enzyme qui catalyse la dégradation du peroxyde d’hydrogène (H2O2) :

Le test consiste à mettre des bactéries en quantité suffisante en contact de peroxyde d’hydrogène (H2O2). Si elles possèdent la catalase, elles dégradent le peroxyde d’hydrogène en eau et dioxygène visible par la formation de bulles.

3) Technique

Déposer sur une lame une goutte d’eau oxygénée (= peroxyde d’hydrogène) à l’aide d’une pipette Pasteur stérilisée au bec électrique
Prélever une colonie à l’aide de l’anse
Etaler la colonie dans la goutte

Remarque : L'’utilisation de l’anse est possible à condition qu’elle ne possède pas d’action enzymatique de la catalase ce que l’on vérifiera facilement par un test sans bactérie.
Causes d’erreurs : 

Réalisation du test sur un milieu contenant la catalase
Exemple : Réalisation du test à partir de colonies prélevées sur gélose au sang (l’hémoglobine possède une activité catalasique pouvant donc donner des résultats faussement positifs)
Quantité de bactéries insuffisante

Eau oxygénée périmée (la tester avec une souche catalase +)