Test oxydase

1) Intérêt

La recherche de l’oxydase présente un intérêt taxonomique en ce qui concerne les bactéries à Gram -.

2) Principe
Le test consiste à mettre en évidence la capacité que possède la bactérie à oxyder un réactif incolore (la NN-diméthyl-paraphénylène diamine) en un dérivé rose violacé.

3) Technique

Placer  un disque oxydase sur une lame à l’aide d’une pince stérilisée au bec électrique.
Avec une pipette Pasteur prélever une colonie sur milieu solide  et la déposer doucement sur le disque.

Remarques : 

Il existe des disques mais aussi des bandelettes oxydases.
Ne pas utiliser l’anse métallique pour prélever les bactéries. En effet, le métal peut être recouvert d’un oxyde et donner un résultat faussement positif.

Le milieu solide ne doit pas contenir d’indicateur de pH, ni de glucides.

4) Lecture
La réaction entre la bactérie et le disque ne met que quelques secondes à se faire.

Causes d’erreurs :

Réalisation du test sur un milieu glucidique (une fermentation peut cacher une respiration
Quantité de bactéries insuffisante ( prélever plusieurs colonies si une ne suffit pas)
Réactif périmé (l tester avec une souche oxydase + et une souche oxydase -)
Utilisation d’un instrument « oxydase + » ( anse de platine, objet métallique)
Lecture trop tardive : au delà de 30 secondes