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====== Atelier : germination sur gel ======
===== Objectif =====
Cet atelier est une introduction à la culture de plante //in vitro//. Il a pour objectif de faire germer des graines d'//Arabidopsis thaliana//, d'apprendre l'utilisation du matériel et les bons réflexes de laboratoire. 

===== Thématiques abordée =====
  * Réalisation d'un milieu de culture
  * Germination de plantes
  * Utilisation du phytotron

==== Réalisation d'un milieu de culture ====
Nous allons préparer un milieu de culture appelé Murashige and Skoog.
  * 4,4 g de MS 
  * 5g de sucrose
  * 10g d'agar-agar
  * 1L d'eau distillée

Le milieu de culture est ensuite stérilisé à l'autoclave sur un cycle de 20 minutes à 120°C.
==== Mise en culture ====

Une fois le cycle d’autoclavage terminé, le milieu chaud (>60°C) est encore liquide. Il peut être versé immédiatement (attention aux brûlures) dans des boites de pétri (diam. 96mm) sur une hauteur de 5mm environ correspondant à 15mL.

Laisser le milieu refroidir et se solidifier. Il convient de travailler en condition stériles, de préférence sous un flux d'air horizontal (hotte à flux laminaire par exemple) et de laisser les boites légèrement entre-ouvertes, le temps du refroidissement, pour éviter la condensation à l'intérieur du couvercle.


Une fois le gel formé les graines sont déposées à sa surface. Les boites sont ensuite scellées avec du parafilm. A partir de ce moment il n'est plus nécessaire de travailler en conditions stériles.

Les boîtes sont placée dans un phytotron paramétré selon le cycle : 14 heures de luminosité 70% / température 25°C et 10 heures luminosité 0% / température 22°C.

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