Projet OANE : étude de l'effet de la photopériode sur la germination du haricot commun //Phaseolus vulgaris//.

Porteurs du projet: Morgane Bequet-Rennes, Kenza Qitout, Enguerran Cochard et Mélanie Gouret. (contact : mbequetrennes@gmail.com)

Introduction :

• Date de début : 01/2017.
• L'objectif de ce projet est d'étudier l'effet de la photopériode sur la germination (sens large) du haricot commun Phaseolus vulgaris (Fabaceae).
• Date de fin estimée : 02/2017.

Nous utilisons le Phytotron du Greenlab et une balance de précision du Greenlab (marque VWR).

- 3 boîtes de graines de haricot, variété Mogex, de marques différentes (Les doigts verts acheté 12,40€, Vilmorin acheté 11,50€, Godian acheté 9,50€) - 4 boîtes en plastique transparentes avec couvercle - du coton - de l'eau en bouteille (marque Critalline, même source pour avoir une composition constante, achetée 20 centimes la bouteille) - 4 pots de confiture en verre vides - une boîte en carton

• Préparer deux cycles pour le phytotron. Le premier “jours courts” réalisera 15 heures de nuit (température 10°C et luminosité 0%) et 9 heures de jour (température 22°C et luminosité 90%). Le second “jours longs” réalisera 9 heures de nuit (température 10°C et luminosité 0%) et 15 heures de jour (température 22°C et luminosité 90%).
• Prendre 32 graines de chaque marque au hasard en excluant les individus extrêmes : taille trop grande ou trop petite
• Peser les échantillons de chaque marque pour avoir un poids moyen.
• Répartir les 32 graines de chaque marque en 4 lots de 8 graines.
• Regrouper 3 lots de marques différentes pour obtenir au final 4 lots de 24 graines.
• Chaque lot est placé dans un bocal de confiture
• Fermer le pot hermétiquement, en plaçant une feuille entre le couvercle et le pot pour absorber l'humidité éventuelle.
• Mettre les pots à l'obscurité.
• Placer dans 4 boites en plastique un fond de coton humide.
• Placer les lots dans les différentes boites
• Lancer le phytotron avec le programme correspondant au traitement
• Placer les boites dans le phytotron
• Relever régulièrement le nombre de graines ayant germé
• Après une semaine, mesurer la taille de l'hypocotyle, l'épicotyle et relever les stades des différentes plantules (stade avec radicule uniquement et avant plumule, stade plumule, stade avec feuilles).

• *Le 27 janvier 2017 : Nous avons commencé à préparer les haricots pour la première session. Nous avons pris 32 graines de chaque marque au hasard en excluant les individus extrêmes (trop grande ou trop petite taille). Nous avons ensuite pesé séparément les échantillons de chaque marque 3 fois chacun avec une balance de précision, pour obtenir un poids moyen. Nous avons ensuite mis 8 graines au hasard de chaque échantillon dans des pots de confiture bien secs séparés, pour avoir 4 lots de 24 graines provenant de 3 fournisseurs différents. Les pots ont été fermés hermétiquement avec une feuille entre le pot et le couvercle pour absorber l'humidité éventuelle, et mis à l'obscurité dans une boîte en carton. Le but est de les stocker au sec et à l'obscurité pour pouvoir commencer l'expérience avec des graines au même stade de dormance. Le 30 janvier 2017 : Nous avons préparé les 4 premières boîtes et lancé la première session (photopériode d'hiver) avec le phytotron. Nous avons décidé d'utiliser un passage brutal de l'éclairement à l'obscurité, qui n'est pas réaliste biologiquement mais plus facile à réaliser et qui permet de garder une intensité lumineuse constante pendant tout le temps de l'éclairement pour les deux photopériodes que nous testons. En effet dans la nature la durée de transition jour/nuit n'est pas constante au cours des saisons et garder la même transition pour nos deux photopériodes ne serait donc pas non plus réaliste. Le seul paramètre qui change entre les deux conditions que nous testons est donc la photopériode (durée d'éclairement). Le 31 janvier 2017 Nous avons sorti les boîtes du phytotron pour voir si les graines avaient germé. Le tégument de certaines graine était déchiré mais aucune radicule n'est sortie. Nous avons remis les boîtes dans le phytotron en modifiant leur position suivant une rotation horaire. Le 1er février 2017 Nous avons sorti les graines du phytotron et nous avons compté le nombre de graines ayant germé. Quelques graines avaient germé. Nous avons décidé de rajouter de l'eau dans les boîtes : avec une micropipette, nous avons ajouté 1 mL à proximité de chaque graine. Nous avons ensuite remis les boîtes dans le phytotron en les faisant tourner suivant une rotation horaire de nouveau. Le 2 février 2017 Nous avons surveillé la germination des graines et fait tourner les boîtes. Le 3 février 2017 Nous avons préparé le matériel pour la prochaine session. Nous avons surveillé la germination des graines. Le 6 février 2017 Nous avons terminé la première session de l'expérience (jours courts). Nous avons mesuré la taille de l'hypocotyle, l'épicotyle et relevé les stades des différentes plantules (stade avec radicule uniquement et avant plumule, stade plumule, stade avec feuilles). Nous avons enclenché la deuxième session (jours longs : 15h de jour/9h de nuit) selon le même protocole que la première session. Le 7 février 2017 Nous avons repris nos observations : aucune graine n'a germé pour la session 2 au bout d'un jour. Nous avons fait tourné les boîtes (le protocole reste le même jusqu'à la fin de l'expérience, pour toutes les sessions). Le 8 février 2017 Nous avons suivi la germination et ajouté de l'eau aux graines, de la même manière que lors de la première session. Dans deux des boîtes, beaucoup de graines ont germé. Nous avons ensuite tourné les boîtes dans le phytotron. Le 9 février 2017 Suivi de la germination. Nous avons également ajouté de l'eau aux graines de la même manière que lors de la première session. Le 10 février 2017 Nous avons suivi la germination. Nous avons préparé les graines pour la deuxième session de photopériode jours courts (hiver) et nous les avons stockées pour le week-end. Nous avons également retiré des graines pourries. Le 13 février 2017 Nous avons réalisé les mêmes mesures que lors de la première session sur les plantules. Nous avons enclenché la deuxième session de photopériode jours courts. Le 14 février 2017 Nous avons suivi le même protocole que lors des sessions précédentes. Le 15 février 2017 Nous avons suivi le même protocole que lors des sessions précédentes. Le 16 février 2017 Nous avons suivi le même protocole que lors des sessions précédentes. Plusieurs graines de la même boîte (situées à côté) avaient moisi : pour limiter la contamination nous avons décider de les retirer. Le 17 février 2017 Nous avons préparé les graines pour la session précédente et suivi la germination de la session en cours. Le 20 février 2017 Nous avons réalisé les mêmes mesures que lors de la première session de l'expérience sur les plantules. Nous avons enclenché la deuxième session de photopériode jours longs. Le 21 février 2017 Nous avons surveillé la germination des graines. Le 22 février 2017 Nous avons surveillé la germination des graines et ajouté de l'eau suivant le même protocole que les sessions précédentes. Le 23 février 2017 Nous avons surveillé la germination des graines. Le 24 février 2017 Nous avons surveillé la germination des graines et retiré les graines qui avaient pourri.