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wiki:ateliers:germination_gel

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Atelier : germination sur gel

Objectif

Cet atelier est une introduction à la culture de plante in vitro. Il a pour objectif de faire germer des graines d'Arabidopsis thaliana, d'apprendre l'utilisation du matériel et les bons réflexes de laboratoire.

Thématiques abordée

  • Réalisation d'un milieu de culture
  • Germination de plantes
  • Utilisation du phytotron

La réalisation d'un milieu de culture

Nous allons préparer un milieu de culture appelé Murashige and Skoog.

  • 4,4 g de MS
  • 5g de sucrose
  • 10g d'agar-agar
  • 1L d'eau distillée

Le milieu de culture est ensuite autoclavé à 120°C pendant 20 minutes

Mise en culture

Une fois le cycle d’auto-clavage terminé, le milieu alors liquide est versé dans des boites de pétri de façon à avoir une épaisseur d'un centimètre environ. Nous laissons alors le milieu refroidir et se solidifier.

Une fois le gel formé les graines sont déposées à sa surface et les boites sellées avec du parafilm et placée dans le phytotron. Le phytotron est ensuite paramétré pour réaliser un cycle : 14 heures à 70% de luminosité et 25°C et 10 heures à 0% de luminosité et 22°C

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wiki/ateliers/germination_gel.1652786706.txt.gz · Dernière modification: 2022/05/17 11:25 de huberts