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Mise au point d'une technique simple pour réussir la polymérisation des géloses d'agar en conditions acides (de pH<7 à pH«7)

A pH acide (<7) l'agar fondu ne polymérise plus correctement une fois que le température atteint son point de solidification du fait d'une hydrolyse lors de l'autoclavage. Ceci pose problème pour les essais de culture nécessitant l'incorporation d'un acide faible dans le milieu (e.g. acide aminé) ou un substrat plus ou moins acide pour limiter la prolifération bactérienne concurrentielle (e.g. phase de croissance du mycélium de Pleurotus citrinopileatus)

plusieurs approches sont possibles comme

• augmenter le pourcentage d'agar dans le milieu, mais cela modifie l'accessibilité aux ressources du substrat
• corriger le pH avant autoclavage, mais cela donne un milieu aux propriétés chimiques différentes de celles souhaitées
• corriger à postériori avant coulage, même problème que précédemment et difficulté à lire un pH à température variable
• …

on trouve d'autres méthodes à confirmer, en particulier la correction du pH ou l'ajout des éléments acides à postériori juste avant le coulage, ce qui nécessite une phase expérimentale et la gestion de la température et de la durée avant coulage et refroidissement pour éviter l'hydrolyse.

Nous allons tester cette approche pour :

1. valider son efficience
2. connaître sa fourchette d'utilisation