Cuve d'électrophorèse avec visualisaton en direct de la migration
Appareil d'électrophorèse en temps réel
Le modèle VWR® Real Time Electrophoresis System permet de couler un grand gel ou deux petits gels d'agarose en même temps, puis de faire migrer vos extraits d'acides nucléiques (ADN, ARN), tout en les visualisant grâce à un appareil transilluminateur, emboîtable en dessous de la cuve de migration.
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Consignes
L'appareil doit être branché à un réseau de 100~120 VCA. Sinon il faut utiliser le transformateur pour un réseau de 220 VCA !!!
Ne pas manipuler l'appareil avec les mains humides
Ne pas exposer l'appareil à l'eau ou un fort taux d'humidité
Ne pas exposer l'appareil directement au soleil ou aux lumières fortes
Ne pas exposer la machine au feu ou à de fortes sources de chaleur
Ne pas exposer exposer la machine à des gaz corrosifs ou de fort champs magnétiques
Ne pas exposer la machine à la poussière
Ne pas cogner ou déplacer l'appareil lors de son fonctionnement
Ne pas mettre ses mains ou un quelconque objet dans la cuve de migration lors du fonctionnement de la machine
Ne pas débrancher la cuve lorsqu'elle est allumée
Matériel
Mode d'emploi
1. Couler les gels
La première étape consiste à couler les gels dont vous aurez besoin pour effectuer votre migration. Ce kit permettant d'effectuer des migration d'extraits d'acide nucléiques; les gels coulés sont donc uniquement des gels d'agarose, coulés à l'horizontal. Selon le pourcentage d'agarose du gel, celui-ci retiendra plus ou moins les petits fragments de matériel génétique. Un gel à 0.5% d'agarose permet ainsi l'analyse de fragments compris entre 30 000 et 1000 paires de bases, tandis qu'un gel à 2% d'agarose permet plutôt l'analyse de fragments de 2000 à 50 paires de bases. En fonction de vos fragments, vous pouvez donc choisir le bon pourcentage d'agarose.
Selon le nombre d'échantillons à faire migrer, vous pouvez choisir les peignes à 12 ou 22 dents; de même, selon la durée de vote électrophorèse ou sa résolution, vous pouvez couler votre gel dans les petites plaques (10.5x6 cm) ou la grande plaque (10.5x10 cm), et placer le diviseur de plaques amovible dans la fente correspondante.
- Placer le support opaque sur une surface plane et rajouter le séparateur de manière approprié afin d'éviter des fuites. On peut le placer dans l'encoche centrale si on veut deux petites plaques de gel ou dans une encoche latérale si on veut une grande plaque de gel.
- Déposer un des plateau transparent selon la quantité de gel à couler.
- Placer le peigne sur la plaque. Si on utilise le peigne à 22 dents veiller à ce que l'encoche des dents soit tournée vers la direction opposée à celle de la migration.
- Verser le gel sur le plateau de manière à former approximativement une couche de 4mm d'épaisseur et attendre environ 20 min que le gel se solidifie.
- Soulever délicatement le peigne pour le retirer. Les petits trous formés par le peignes doivent restés droits et sans dommages.
- Retirer délicatement le plateau transparent. Maintenant, notre gel est prêt.
2. Préparation du réservoir
- déposer le plateau contenant le gel au centre de la plaque transparente. Si vous avez choisi le grand plateau, il devrait recouvrir l'entièreté de la plaque transparente. Si vous avez choisi le petit plateau, des petites encoches vous aideront à correctement placer ce dernier
- Verser délicatement une solution tampon quasiment jusqu'à recouvrir le gel. La solution tampon doit arriver à hauteur du gel pour faire contact mais pas le recouvrir complètement (le courant ne traverserait alors que la solution et pas le gel). Typiquement, 200ml de solution tampon est nécessaire. Remarque: d'après le constructeur, il est recommandé d'utiliser du TAE ou du TBE avec une concentration de 0.5
- brancher l'alimentation au réservoir de migration.
