Spectrophotomètre UV-visible (Jenway)

SpectromèPrésentation 

 

 

 

Spectromètre àà cuve permettant des mesures dans des liquides en spectre continu de l'UV-visible . 

A savoir:

Il existe plusieurs types de cuve suivant l'ééchantillon.

La transmittance T est dédéfinie par : T = I_t,λλ / I_0,λλ. On l’l’exprime en pourcentage.

L’L’absorbance A se calcule par : A = log(I_0,λλ / I_t,λλ) = - logT. C’C’est une grandeur positive.

Ici on va mesurer l’l’absorbance en fonction de diffédifférentes longueurs d'ondes en nanomènanomètre.(ponctuel)

Aller dans le menu «« Photometrics »»

1. Choisir ses paramèparamètres de mesures : longueur d’d’onde (nm)
   
2. Faire la calibration  avec le bouton "Blank"  en utilisant la mêmême longueur d’d’onde préprévue pour la mesure (l’l’absorbance doit êêtre àà 0.00 et la transmittance àà 100%)
3. InséInsérer l’él’échantillon et exéexécuter la mesure avec la touche "sample"

Il est éégalement possible d’d’effectuer un spectre d’d’absorption en fonction de plusieurs longueurs d’d’ondes. (Continu)

Aller dans le menu «« Spectrum »»

1. choisir ses paraméparamétrer de mesures:  intervalle du spectre ( ««  »» et la «« fin »» de la mesure souhaitésouhaitée); la fréfréquence des mesures souhaitésouhaitées
2. Faire la calibration avec «« Blank »» .
3. InséInsérer l’él’échantillon et exéexécuter avec «« sample »»
4. relever le spectre 

Il est également possible de trouver une courbe pour mesurer la concentration ou mesurer la concentration en utilisant un facteur ou un standard. (Continu)

Aller dans le menu « Quantitation »

1. choisir ses paramétrer de mesures
   
2. Faire la calibration avec « Blank » .
3. Insérer l’échantillon et exécuter avec « sample »

Calcul de la concentration molémoléculaire du D-Mannitol:

c = m/(M*V) 

• M = 182.17 g/mol,mol

  m = 0.5 g,g

  V = 1 mL,mL

  c = 2,74 mol/L

• On va faire une dilution

  d'un facteur 10.
  

• On utilise l'ééquation c*V=C2*V2C1V1=C2V2

  pour

  C1 trouver= la2,74

  nouvelle

  V1 concentration
  = 1mL 

• V2 = 10mL (On veut un volume final de 10mL)

  10mL

on
• =>cherche C2 = 0,274 mol/L
• avec le spectrophotomètre on a trouvé