System Gold™ HPLC instrument

Qu'est-ce que l'HPLC : L'HPLC (High Performance Liquid Chromatography) est une technique de séparation analytique de molécules présentes dans un échantillon, ce qui permet leur analyse qualitative et quantitative. Dans cette technique, une phase mobile (éluant) et une phase stationnaire (colonne) permettent la séparation des molécules d'un échantillon en fonction de différents critères. Elle est utilisée par de nombreuses industries, comme la pharmacie et la biopharmacie, l'alimentation, la cosmétique...

En fonction de la colonne et de l'éluant choisi pour l'analyse, le type de chromatographie peut différer. Voici certains des différents types de chromatographies que nous pouvons réaliser :

Chromatographie d'adsorption
Chromatographie de partage (la plus utilisée):
- En phase normale. Les phases mobile et stationnaire sont polaires
- En phase inversée. La phase stationnaire est apolaire mais la phase mobile reste polaire
Chromatographie par échange d'ions
Chromatographie d'exclusion stérique (en fonction de la taille des molécules)

Il est important de se renseigner sur la compatibilité des solvants avec les colonnes avant de commencer une manipulation. Il est également nécessaires d'utiliser les bons éluants et colonnes en fonction des espèces pouvant être présentes dans un échantillon.

Description générale

Le chromatographe HPLC que nous utilisons (Beckman Coulter System Gold) est une chaine composé de plusieurs sous blocs, chacun ayant une fonction qui lui est propre.

1) Pompe ou "Solvent Module" :

Le role de cette pompe est d'envoyer l'éluant (ou les éluants) sélectionné à travers la chaine de chromatographie. Le modèle que nous utilisons est le "Solvent Module 126". Il permet un mélange de plusieurs solvants, afin d'éviter à avoir à préparer nous meme un éluant au préalable.

Pompe "Solvent Module 126"

Les flacons de solvant sont placés en haut de la colonne et sont reliés à des pompes A et B, qui permettent un mélange des solvants avec les rapports qui nous intéressent. Le flux débité par la pompe est ensuite envoyé directement vers le deuxième bloc du système HPLC, c'est-à-dire l’échantillonneur automatique (Autosampler). Tous les paramètres permettant de contrôler la pompe (débit, pressions minimale et maximale, choix des solvants pour les pompes A et B, rapport A:B) sont modifiés depuis l’ordinateur.

2) Échantillonneur automatique ou "Autosampler 507e"

NB : l’échantillonneur est détecté en tant que "Autosampler 507e" par le logiciel 32 Karat, même s'il se nomme en réalité "Autosampler 508".

Le role de l'échantillonneur et de réaliser automatiquement le prélèvement de différents échantillons préparés et placés au préalable dans des flacons

Dans le cadre du système Beckman HPMC, l'échantillonneur automatique modèle 507e peut être contrôlé par l'ordinateur exécutant le logiciel System Gold ou par le centre de contrôle du système intégré au module de pompe à solvant modèles 118, 117 et 128. Communications entre le modèle 507e et l'un ou l'autre système de contrôle et tout d'autres appareils comprenant un système HPLC (Pompe, Détecteur, ect) sont interconnectés via le Gold Bus. Un câble Gold Bud est livré avec le modèle 507e. La connexion de ce câble au système HPLC est décrite dans la section 2.

Cette section sera divisée en deux parties, chaque partie traitant des spécificités du système de contrôle utilisé. les deux systèmes de contrôle seront identifiés comme suit :

Système Gold

Le terme Gold System sera utilisé pour représenter le système nécessitant un ordinateur et un logiciel système Gold pour contrôler le système HPLC en plus du modèle 507e.

Système CSC

Le terme système SCC (stands pour System Control Center) sera utilisé pour représenter le système contrôlé à partir de la pompe modèle 118, 127 ou 128. Ces pompes font partie intégrante du système HPMC en plus du modèle 507e.

Étant donné que les systèmes Gold et SCC sont traités en détail dans des manuels d'exploitation distincts, seuls les détails associés au système

A) LES UNITÉS

1. L'ordinateur : application 32 KARAT SOFTWARE

NB : Aucune connaissance informatique n'est requise. L'ordinateur n'a pas de mot de passe.

Le logiciel Gold, apporte 3 niveaux d'interaction et de contrôle à la chromatographie haute performance.

Gestionnaire pour 1 ou 2 systèmes HPLC, repérés SYSTEM1 ( carte PCI1 ) et SYSTEM2 ( carte PCI2 ) , chaque système pouvant contenir jusqu'à 8 modules (pompes, détecteurs, interfaces etc...). Chaque système peut acquérir le résultat à deux longueurs d'onde), ces deux voies étant appelées CHANNEL A et CHANNEL B. En contrôle direct (direct control), ou en automatique au travers de méthodes (edit method), l'ordinateur coordonne le fonctionnement de chacun des modules HPLC. Bien qu'il soit prévu pour un fonctionnement avec des éléments BECKMAN, il peut être connecté à d'autres éléments au travers d'une interface (modèle 405) permettant des contrôles par des contacts de relais et/ou le traitement du signal d'un détecteur.
Collecte les chromatogrammes des analyses effectuées, les analyse, les transcrit en un rapport final, et/ou les stock, permettant ainsi un retraitement ultérieur. La calibration et les résultats des échantillons analysées sont réalisés facilement, le rapport final apparaît dans le format et avec les informations qui sont le plus appropriées.
Retrait des résultats (outil très puissant). Chaque donnée étant stockée en mémoire (sur disque dur ou sur disquette), il permet de réanalyser tout échantillon désiré pour corriger des erreurs ou déterminer l'effet de calibrations différentes. La puissance des analyses chromatographiques et des fonctions de balayage en longueurs d'onde permet une étude approfondie des résultats obtenus, non possible jusqu'à présent.

Informations sur l'ordinateur à disposition :
- windows 2000 Professional
- carte mère spécifique aux machines HPLC (les deux)
- ram : 4 giga
- Processeur : Itel(R) Pentium, (R) 4 CPU 3.20GHz, AT/AT COMPATIBLE, 3,135,980 KB RAM

2. Low temperature evaporative light scattering detector : Sexel Model 80

3. Spectrofluorometric detector : RF-10 Axl