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Label vert: La larve mangeuse de plastique

Nom : LE TOQUIN Juliette, SOUFIANI Noha, BOUATIR Fatima Ezzahraa, FERNANDES PEREIRA Alizée

Projet : La larve Galleria Mellonella mangeuse de plastique (PS/PEBD)


Introduction:

Le plastique est une matière qui pollue Ă©normĂ©ment et elle se retrouve bien trop souvent dans l’environnement.  Le problème qui se pose est la dĂ©gradation totale ou partielle du plastique. On souhaite donc au travers de notre projet prĂ©senter une nouvelle mĂ©thode de dĂ©gradation du plastique qui est encore en cours de dĂ©veloppement. En effet, des recherches rĂ©centes ont essayĂ© de dĂ©terminer la capacitĂ© de certaines larves Ă  dĂ©grader le plastique. 


Objectif : Notre projet a pour but d’étudier l’efficacité de l'une des larves étudiées, la larve Galleria Mellonella, à dégrader le plastique et de pouvoir comparer les différents résultats. Dans notre cas, nous prendrons deux types de plastiques différents: du polyéthylène basse densité (PEBD) et du polystyrène (PS). En effet, nous cherchons donc à mettre en confrontation nos différentes expériences.

  • Etude bibliographique et documentation
  • CrĂ©ation d'un poster
  • ExpĂ©rience au Fablab (Biologie-Chimie et Prototypage)


Galleria mellonella (Gm) est une espèce de Lepidoptera dans la famille Pyralidae. NommĂ©e teigne de ruche, c'est une larve que l'on utilise principalement pour la pĂŞche. Son cycle de dĂ©veloppement varie de 4 semaines Ă  6 mois selon les conditions et comprend 4 phases (Ĺ“uf, larve, nymphe et adulte). C'est dans les alentours de mars qu'elle se dĂ©veloppe et atteint son pic autour d’aoĂ»t. Dans le cadre de ce projet, nous allons nous intĂ©resser seulement Ă  son stade de larve.


Expérimentation/Manipulation:

I/ Protocole expérimental: Préparation des tests + témoin

Fablab prototypage: 

1. Broyer les bouteilles en PEBD 

Fablab de biologie:

2. Nettoyer les béchers/erlenmeyers/cristallisoirs à l'éthanol

3. Faire des copeaux de cire d'abeille Ă  l'aide d'un Ă©conome/scalpel

4. Émietter le PS en petits morceaux

5. Avant toutes prĂ©parations, peser les rĂ©cipients, le PEBD, le PS, les copeaux de cire, et les larves Ă  l'aide d'une balance de pesĂ©e 

6. Mises en places des tests/tĂ©moins* : 

  • TĂ©moin: BĂ©cher de 500 ml + 10.85 g de cire + 4543 larves Gm (18.855 g) 
  • Test 1: BĂ©cher de 250 ml (90,5968g) + 10.85 g de cire + 3334 larves Gm (15.9 g) + 0.7 g de PS
  • Test 2: BĂ©cher de 250 ml (118,57g) + 10.85 g de cire + 3336 larves Gm (15.5419 g) + 10.8 g de PEBD
  • Test 3: Erlenmeyer de 250 ml (134,4g) + 36 larves Gm (16.05g)  + 17.15 g de PEBD
  • Test 4: Erlenmeyer de 250 ml (134,6g) + 44 larves Gm (20,27g)  + 1 g de PS
  • Test 5: Cristallisoir de 795 g + 29 larves Gm (14.6296 g) + 2,6301 g de PEBD (film alimentaire). Le cristallisoir est recouvert par son couvercle en verre.
  • Test 6: Cristallisoir de 991.84 g + 10.88 g de cire + 38 larve Gm (18.1318 g) + 2.7634 g de PEBD (film alimentaire). Le cristallisoir est recouvert par son couvercle en verre.
  • Test 7: BĂ©cher de 800 ml (243.38 g) + 4038 larves (18.547 g) + 1.0735 g de PS

7.  Mettre les tests/tĂ©moin dans une grosse boĂ®te en plastique que l'on mettra dans une salle close, sans lumière, Ă  22-23°C.

* rĂ©cipients couverts avec du papier aluminium rempli de petits trous 

Matériel nécessaire à la réalisation de nos expériences:

  • Fablab de Biologie: 350 larves Gm vivantes, bloc de cire d'abeille, 1 bĂ©cher de 500 ml, 2 bĂ©chers de 250 ml, 2 erlenmeyers de 250 ml, 2 cristallisoirs, papier aluminium alimentaire, une Brucelles en plastique, plaque de polystyrène, 2 bouteilles en PEBD, thermomètre mercure, scalpel, Ă©conome 
  • Fablab de Chimie: Accessoire ATR diamant, Ă©thanol de nettoyage
  • Fablab prototypage: broyeuse


II/ Observations: 

Dates, T(°C),  TĂ©moin

Test 1

Test 2 Test 3 Test 4 Test 5
Test 6
Test 7

27/03/2023, 14h40, 22°C

8 mortes 8 mortes 10 mortes  X X X X X

29/03/2023, 16h21, 23°C

6 mortes 1 morte 4 mortes 12 mortes 9 mortes X X X

31/03/2023, 9h57,

23°C

4 mortes* 5 mortes 1 morte*

8 mortes* + perte de PE

13 mortes* X X X

03/04/2023, 11h17,

22°C

2 mortes *


0 morte


5 mortes *


5 mortes 10 mortes X X X
05/04/2023, 11h, 22.5°C

0 morte *


0 morte *


0 morte *


0 mortes 6 mortes X X X

07/04/2023, 12h,

24°C

0 morte

2 mortes

0 morte

1 morte
0 morte
X X X

11/04/2023, 13h53,

23°C

1 morte

0 morte

0 morte *

1 morte 1 morte 2 mortes X X

13/04/2023, 10h30,

23°C

0 morte

0 morte

0 morte

0 morte 0 morte 1 morte 1 morte 1 morte  (+1 cocon)

14/04/2023,

14h,

22,5°C

0 morte

0 morte

1 morte

0 morte 1 morte 1 morte 0 morte 5 mortes

18/04/2023, 13h20,

23,5°C

1 morte

1 morte

1 morte

4 mortes
1 morte
1 morte
1 morte
8 mortes
  • 23/03/2023, 12h, 23°C: mise en place du tĂ©moin et des tests 1 et 2 ( arrivĂ©e des larves depuis 2j (au frais))
  • 27/03/2023, 14h50, 22°C: mise en place des tests 3 et 4 (arrivĂ©e jour mĂŞme)
  • 07/04/2023, 12h, 24°C: mise en place du test 5 (arrivĂ©e des larves la veille (au frais))
  • 11/04/2023, 15h15, 23°C: mise en place des tests 6 et 7 (arrivĂ©e des larves le 6/04/23 (au frais))

05/04/2023: diminution forte de la cire

* prĂ©sence de soie 


À la fin de l'expérience :


TĂ©moin Test 1 Test 2 Test 3 Test 4 Test 5 Test 6 Test 7
durée 3 semaines et 1 jour
3 semaines et 1 jour 3 semaines et 1 jour 2 semaines et 6 jours
2 semaines et 6 jours 1 semaine
5 jours
5 jours
final

20 larves vivantes : 6,4352g

et un cocon

17 larves vivantes: 6,1753g

14 larves vivantes: 4,7291g

et un cocon

5 larves vivantes: 1,6712g

2 vivantes: 0,7676g

et un cocon

23 vivantes: 10,462g

et un cocon

35 vivantes: 14,966g

et un cocon en formation

23 larves vivantes: 9,647g

et un cocon


III/ Analyses expĂ©rimentales

Analyses IR en ATR:

Nom du plastique PEBD PS
Pic(s) caractéristique(s)

Alcane

  • Elongation C-H:  2850-3000 cm-1 (forte intensitĂ©)
  • DĂ©formation C-H: 1350-1480 cm-1 (moyenne intensitĂ©)

Alcane

  • Elongation C-H:  2850-3000 cm-1 (forte intensitĂ©)
  • DĂ©formation C-H: 1350-1480 cm-1 (moyenne intensitĂ©)

Aromatique

  • Elongation C-H: 3000-3100 cm-1 (moyenne intensitĂ©)
  • DĂ©formation C-H: 680-900 cm-1 (forte intensitĂ©)
  • Elongation C=C:  1500-1650 cm-1 (forte intensitĂ©)


  • Analyse en dĂ©but expĂ©rience: 31/03/2023

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  • Analyse en fin expĂ©rience: 18/04/2023

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EXPLOITATION DES RESULTATS

  • Comparaison du spectre IR du PEBD avec les deux spectre "Larves test 2" et celui de "Larves test 3": Nous pouvons observer que les pics caractĂ©ristiques du PEBD ne sont pas prĂ©sents sur les spectres des larves, dont les tests sont composĂ©s de PEBD. Pour illustrer ce propos, nous pouvons relever que les 2 pics de forte intensitĂ© Ă  2800 cm-1 et 2900 cm-1 prĂ©sent sur le spectre IR du PEBD, ne sont pas observable sur sur les spectre du test 2 et 3. 


  • Comparaison du spectre IR du PEBD avec les deux spectre "Larves test 1" et celui de "Larves test 4": la mĂŞme observation que celle pour le PEBD: nous n'observons pas de pics Ă  


CONCLUSION

Nos expériences ne nous ont pas permis de confirmer la biodégradation du polyéthylène basse densité et du polystyrène par les larves Galleria Mellonella. Ces résultats peuvent avoir été causé par de nombreux paramètres que nous avons du changer comparer à ceux établit dans les articles de références. Ainsi nous avons utilisé de plastiques (PEBD et PS) non stérilisés, effectuer des analyses IR en ATR, effectuer nos tests dans des béchers/erlenmeyers/cristallisoirs. Or eux, dans leurs cas, le plastiques avaient été stérilisés avant son introduction dans les tests, ils ont caractérisé leurs éléments à travers des analyses plus précisent de l'ATR: FTIR, GC-MS ou l'imagerie hyperspectral.

Une autre conclusion que nous pouvons émettre est que le spectre de la larve témoin possède des pics au même endroit que les pics caractéristiques des plastiques, il est possible que la présence de pics des plastiques soit masquée par le spectre de la larve.


BIBLIOGRAPHIE