Tehcnique d'extraction ADN de cellules végétales
But :
En biologie moléculaire, de nombreuses techniques se basent sur l'analyse et le traitement de l'ADN (Acide DesoxyriboNucléique), à ne pas confondre avec l'ARN (Acide RiboNucléique).
C'est le cas de la Polymérase Chain Reaction (PCR), Southern Blot, utilisation d'enzymes de restriction, hybridation moléculaire...
Pour ce faire, il est nécessaire d'isoler l'ADN de son environnement (cellule, tissus) pour obtenir d'un échantillon pur et et quantité suffisante pour servir de base pour les techniques suivantes.
Méthode classique : Fruit : oignon, banane, kiwi :
Protocole du département inforsciences Université libre de Bruxelles ULB :
https://hal.inrae.fr/hal-02628282/document
Matériel
Oignon, banane ou kiwi : 1 (+/- 100 g)
Eau distillée : 100 ml
Sel de cuisine : 3 g
Produit vaisselle : 10 ml
Alcool (Éthanol 95 %) froid : 3 ml
Bleu de méthyle : quelques gouttes
Couteau & planche à découper
3 pipettes pasteur de 3 ml
1 tube à essai
1 porte tube à essai
1 entonnoir
1 filtre à café
1 erlenmeyer de 250 ml
1 béchers de 400 ml
2 verres de montre
1 cuillère en plastique
1 pince fine
Protocole :
Technique d'extraction d'ADN génomique de végétaux permettant l’amplification de longs fragments à partir d'une petite quantité de matériel. https://hal.inrae.fr/hal-02628282/document