Milieu de séléction

Introduction

MilieuxLes milieux de culture de bactérie font souvent l'objet d'étude en microbiologie. Il est possible de travailler sur des milieux sélectifs permettant de sélection.pdflectionner un ou plusieurs types de microorganismes selon différents facteurs. On dit d'un milieu qu'il est sélectif lorsque les besoins nutritifs et les conditions de développement propres à une espèce microbienne sont respectés pour que celle-ci vive. 

Ainsi, il existe de nombreux milieux où ces conditions (pH, température d'incubation, source nutritive...) diffèrent afin d'avoir un panel de milieux de sélection intéressant. 

Type de milieu sélectif

Gélose MacConkey 

Ce milieu permet de sélectionner des bacilles Gram-négatif, qui deviennent rose si elles fermentent le lactose. Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 7,2 +/- 0,2 et une température d'incubation à 25°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante:

• • • • 17,0 g de peptone pancréatique de gélatine 
        
      • 1,5 g de tryptone
      • 1,5 g de peptone pepsidique de viande 
      • 10,0 g de lactose
      • 1,5 g de sels biliaires
      • 5,0 g de chlorure de sodium
      • 30,0 mg de rouge neutre
      • 1,0 mg de cristal violet
      • 13,5 g d'agar agar bactériologique

Gélose Sabouraud

Ce milieu permet de sélectionner des fungi et particulièrement des levures, des dermatophytes et autres champignons pathogènes ou non. Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 5,6 +/- 0,2 et une température d'incubation à 25°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante:

• • • • 5,0 g peptone de caséine
      • 5,0 g de viande 
      • 40,0 g glucose monohydraté 
      • 15,0 g d'agar agar 
      • 0,50 g de chloramphénicol pour inhiber la croissance des Gram

Gélose XLD

Ce milieu permet de sélectionner les agents pathogènes entériques Gram-négatifs et particulièrement les salmonelles et les shigelles. Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 7,4 +/- 0,2 et une température d'incubation à 25°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante:

• • • • 3,0 g d'extrait autolytique de levure 
      • 5,0 g de L-lysine
      • 7,5 g de lactose
      • 7,5 g de saccharose
      • 3,5 g de xylose
      • 2,5 g de désoxycholate de sodium
      • 5,0 g de chlorure de sodium
      • 6,8 g de thiosulfate de sodium
      • 0,8 g de citrate d'ammonium ferrique
      • 80,0 mg de rouge de phénol pour la coloration
      • 13,5 g d'agar agar 

Gélose Drigalski

Ce milieu permet de sélectionner des bacilles à Gram-négatif non exigeants. Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 7,4 +/- 0,2 et une température d'incubation à 25°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante:

• • • • 15,0 g de peptone
      • 15,0 g de lactose
      • 3,0 g d'extrait de viande
      • 3,0 g de levure
      • 1,0 g de désoxycholate de sodium
      • 5,0 mg de cristal violet
      • 1,0 g de thiosulfate de sodium
      • 80,0 mg de bleu de bromothymol
      • 11,0 g d'agar agar

Gélose TCBS

Ce milieu permet de sélectionner de Vibrio. Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 8,6 +/- 0,2 et une température d'incubation à 50°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante:

• • • • 20,0 g de saccharose
      • 10,0 g de citrate de sodium
      • 10,0 g de dipeptone
      • 10,0 g de thiosulfate de sodium
      • 10,0 g de chlorure de sodium
      • 5,0 g d'extrait de levure
      • 5,0 g d'oxbile (Oxgall)
      • 3,0 g cholate de sodium
      • 1,0 g citrate ferrique
      • 40,0 mg de bleu de bromothymol
      • 40,0 mg de thymol bleu 
      • 15,0 g d'agar agar

Lorsque les colonies deviennent jaunes, le milieu s'est acidifié par fermentation du saccharose (saccharose+), à l'inverse, sans fermentation, elles deviennent vertes ou bleues (saccharose-).

Gélose de Chapman ou gélose au sel de mannitol

Ce milieu permet de sélectionner des . Les conditions de culture de ce milieu sont un pH à 7,4 +/- 0,2 et une température d'incubation à 25°C. La composition du milieu pour 1L est la suivante: