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Bioluminescence en fonction de chaque paramètre

1) Protocole expérimental 

  • On a lancé des cultures avec la suspension mère du 09/05/2025
  • Pour ce faire on a mis : 200µL de la suspension mère dans 10mL de milieu.  

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On a laissé incuber les cultures 16h à température ambiante dans la réserve. On a ensuite transféré 250µL dans les puits des microplaques. On a ensuite mesuré la bioluminescence exprimé en RLU ( Relative light unit) avec le lecteur de plaque luminomètre BertholdTech TriStar2S.    

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2) Résultats

Echantillon  Mesure 1 (RLU)  Mesure 2 (RLU)  Mesure 3 (RLU)  moyenne
Sel marin 

44845504

46015056 46768168 45 876 243
NaCl 10g/L 235183 112455 1790293
NaCl 20 g/L 60977620 60070600 58558968
NaCl 30 g/L Overload Overload Overload  
NaCl 40 g/L Overload Overload Overload

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Echantillon  Mesure 1 (RLU)  Mesure 2 (RLU)  Mesure 3 (RLU)  moyenne 
Sans glycérol  33247172 32239560 33735476
Glycérol 3g/L 42860224 42131648 40296944
Glycérol 4g/L 45816200 45822756 47212044
Glycérol 5g/L 30895180 31607086 32870984  
Glycérol 6g/L 46946548 43893304 43641736

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Echantillon Mesure 1 (RLU)  Mesure 2 (RLU)  Mesure 3 (RLU)  moyenne 
Sans asparagine  32419202 35136032 31284540
Asparagine 20g/L Overload Overload Overload Overload
Asparagine 30g/L 62468408 58194472 59331008
Asparagine 40g/L Overload Overload Overload Overload
Asparagine 50g/L Overload 62883208 49083528 /

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Echantillon Mesure 1 (RLU)  Mesure 2 (RLU)  Mesure 3 (RLU)  moyenne
Sans tryptone  31655116 32114984 30762482
Tryptone 20g/L 39209212 39168668 43397976
Tryptone 30g/L 51469600 57521668 57203196
Tryptone 40g/L 44447328 47998668 47332372
Tryptone 50g/L 42574080 43918224 40970844  

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3) Discussion 

Nous avons obtenu des valeurs globalement très élevé en URL ( de l'ordre de 10^7 URL) . Il faut préalablement dilué nos échantillons et mettre un volume plus petit (150-200µL) pour pouvoir quantifier la bioluminescence et éviter la surcharge. De plus, il faut faire un témoins négatif (eau distillé) pour avoir une valeur de référence sans bioluminescence.