Bioluminescence en fonction de chaque paramètre

1) Protocole expéexpérimental 

• On a lancélancé des cultures avec la suspension mèmère du 09/05/2025
• Pour ce faire on a mis : 200µ200µL de la suspension mèmère dans 10mL de milieu.  

             

On a laissélaissé incuber les cultures 16h àà tempétempérature ambiante dans la réréserve. On a ensuite transférétransféré 250µ250µL dans les puits des microplaques. On a ensuite mesurémesuré la bioluminescence expriméexprimé en RLU ( Relative light unit) avec le lecteur de plaque luminomèluminomètre BertholdTech TriStar2S.    

                                       

2) RéRésultats

Echantillon	Mesure 1 (RLU)	Mesure 2 (RLU)	Mesure 3 (RLU)	moyenne
Sel marin	44 845 50444845504	46 015 05646015056	46 768 16846768168	45 876 243
NaCl 10g/L	235 183235183	112 455112455	179 2931790293	712643,6667
NaCl 20 g/L	60 977 62060977620	60 070 60060070600	58 558 96858558968	59869062,67
NaCl 30 g/L	Overload	Overload	Overload	Overload
NaCl 40 g/L	Overload	Overload	Overload	Overload

                                                                           Figure 1 : La bioluminescence en fonction de la concentration de la NaCl

Echantillon	Mesure 1 (RLU)	Mesure 2 (RLU)	Mesure 3 (RLU)	moyenne
Sans glycéglycérol	33 247 17233247172	32 239 56032239560	33 735 47633735476	33074069,33
GlycéGlycérol 3g/L	42 860 22442860224	42 131 64842131648	40 296 94440296944	41762938,67
GlycéGlycérol 4g/L	45816200	45822756	47 212 04447212044	46283666,67
GlycéGlycérol 5g/L	30 895 18030895180	31 607 08631607086	32 870 98432870984	31791083,33
GlycéGlycérol 6g/L	46 946 54846946548	43 893 30443893304	43 641 73643641736	44827196

                                                                            Figure 2 : La bioluminescence en fonction de la concentration du glycéglycérol 

Echantillon	Mesure 1 (RLU)	Mesure 2 (RLU)	Mesure 3 (RLU)	moyenne
Sans asparagine	32419202	35136032	31284540	32946591,33
Asparagine 20g/L	Overload	Overload	Overload	Overload
Asparagine 30g/L	62468408	58194472	59331008	59997962,67
Asparagine 40g/L	Overload	Overload	Overload	Overload
Asparagine 50g/L	Overload	62883208	49083528	/

                                                                      Figure 3 : La bioluminescence de la bactébactérie en fonction de la concentration en asparagine 

Echantillon	Mesure 1 (RLU)	Mesure 2 (RLU)	Mesure 3 (RLU)	moyenne
Sans tryptone	31655116	32114984	30762482	31510860,67
Tryptone 20g/L	39209212	39168668	43397976	40591952
Tryptone 30g/L	51469600	57521668	57203196	55398154,67
Tryptone 40g/L	44447328	47998668	47332372	46592789,33
Tryptone 50g/L	42574080	43918224	40970844	42487716

                                                               Figure 4 : La bioluminescence de la bactébactérie en fonction de la concentration de tryptone. 

3) Discussion

Nous avons obtenu des valeurs globalement trètrès élevéélevé en URL ( de l'ordre de 10^7 URL) alors que dans la littélittérature c'est dans l'ordre de 10^6 . Il faut prépréalablement diluédilué nos ééchantillons et mettre un volume plus petit (150-200µ200µL) pour pouvoir quantifier la bioluminescence et ééviter la surcharge. De plus, il faut faire un tétémoins nénégatif (eau distillédistillé) pour avoir une valeur de référéférence sans bioluminescence. les conditions favorables pour la bioluminescence de la bactébactérie c'est 20g/L d'asparagine, 30gl/L de NaCl, 30g/L de tryptone et 4g/L de glycéglycérol ce qui correspond àà ce que l'on voit dans la littélittérature. Pour le NaCl, on observe qu'àà 10g/L, il n'y a aucune bioluminescence mais àà partir de 20g/L, la bioluminescence est plus élevéélevée qu'avec le sel marin . Pour le glycéglycérol , il semblerait qu'une concentration àà 4g/L et légèlégèrement plus favorable àà la bioluminescence qu'àà 3g/L. A (G/L . Nous avons observéobservé prépréalablement qu'entre 0 et 10g/L d'asparagine, il n'y a pas d'influence sur la bioluminescence. En revanche, 20g/L d'asparagine suffit pour voir une intensitéintensité nettement plus élevéélevée de la bioluminescence.